离子注入技术是创制植物新种质的有效手段。为探究离子注入红三叶的诱变效应，以不同注入能量和剂量的N+(能量30或50 keV，剂量5×1014或5×1015 ions·cm-2，分别记为N3014、N3015、N5014、N5015)和Ar+(能量30或50 keV，剂量5×1014 ions·cm-2，分别记为Ar3014和Ar5014)注入“鄂牧5号”红三叶种子，研究种子诱变后的萌发特征和生物学特性，并通过株高、单株分枝数、单株花序数、花序小花数、叶片长度、叶片宽度、花序长度以及花序宽度等农艺性状对诱变单株进行变异分析。结果表明，离子注入后红三叶种子表皮具有明显的“灼伤”现象，种皮颜色变成黑褐色。相比于对照，Ar3014处理下发芽率指标值略有提高，处理N3014和N3015的发芽率指标值略有降低，但与对照均差异不显著。N5014处理显著降低了种子发芽率(P<0.05)，比对照低约10%，处理N5015和Ar5014发芽率更是降低超过30%(P<0.05)。注入能量为30 keV的2个N+处理显著增加了胚根体积和胚根长度(P<0.05)。经离子诱变的种子(M1代)种植后生产M2代种子，依次生产M3和M4代种子。M2代植株各性状平均值显著低于对照(P<0.05)，但表现出更大的性状变异特征，为进一步筛选突变材料奠定基础。50 keV的N+和Ar+诱变处理具有更大的诱变效应，但主要是不利突变。红三叶适宜的N+诱变能量为30 keV，剂量为5×1014～5×1015 ions·cm-2。经过4个世代选育，获得8个性状稳定并具有潜在利用价值的M4代突变体材料，为红三叶诱变育种提供基础资料。
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