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　　摘要：可可花瘿病致病菌白壳Albonectria rigidiuscula是我国进境植物检疫性有害生物，已在多个口岸植物入境产品中被截获，存在较大生物入侵风险。为探索口岸适用的现场快速检测技术，根据白壳翻译延长因子TEF1-α的基因序列，基于酶介导双重指数扩增核酸检测技术设计了针对白壳的5条DNA上游引物、6条DNA下游引物和4条RNA探针。通过筛选，获得了扩增效果最佳的上、下游DNA引物和RNA探针组合。灵敏度实验结果表明，其最低检测限量可达0.5 pg·μL-1。实际样品检测结果表明，该方法适用于口岸疑似携带有白壳样品的检测与初筛。该方法具有操作简便、耗时较短、特异性强等优点，整个反应过程仅需30 min，检测过程完全闭管且不需要PCR后续处理，为口岸现场白壳检测筛查提供了重要参考。

　　文章目录

　　1 材料与方法

　　1.1 供试菌株

　　1.2 供试培养基和试剂盒

　　1.3 引物及探针的设计合成

　　1.4 DNA提取

　　1.5 RNA探针筛选

　　1.6 DNA下游引物筛选

　　1.7 DNA上游引物筛选

　　1.8 特异性实验

　　1.9 灵敏度实验

　　1.10     实际样品检测实验

　　2 结果与分析

　　2.1 RNA探针筛选

　　2.2 初轮DNA下游引物筛选

　　2.3 初轮DNA上游引物筛选

　　2.4 特异性实验

　　2.5 灵敏度实验

　　2.6 实际样品检测实验

　　3 讨论