摘要：目的：从PPARγ/NF-κB信号通路探讨四妙勇安汤对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的脂肪细胞炎症的影响及作用机制。方法：采用LPS诱导成熟脂肪细胞制备脂肪细胞炎症模型。给予四妙勇安汤冻干粉干预24 h后观察脂肪细胞炎症信号通路蛋白的表达，给予PPARγ抑制剂GW9662干预后明确四妙勇安汤是否是通过关键因子PPARγ发挥抗炎作用。CCK-8法检测四妙勇安汤对细胞活力的影响；蛋白质免疫印迹法（Western blot，WB）检测细胞内炎性因子IL-6、NLRP3及相关调控因子PPARγ、NF-κB p65、LXRα和GLUT4的蛋白表达。结果：CCK-8检测结果显示四妙勇安汤冻干粉在浓度为0 ～500 μg/mL范围内对细胞活力无显著影响。WB结果显示：经1 μg/mL LPS刺激脂肪细胞造模，与对照组相比，模型组细胞内炎症因子IL-6、NLRP3蛋白表达增加，PPARγ蛋白表达降低、NF-κB p65蛋白表达增加，LXRα、GLUT4蛋白表达均降低；与模型组相比，四妙勇安汤组细胞内炎症因子IL-6、NLRP3蛋白表达降低，且呈剂量依赖性变化趋势，并明确四妙勇安汤干预最佳药物浓度为250 μg/mL；给予中剂量四妙安勇汤干预后，脂肪细胞内PPARγ、LXRα、GLUT4蛋白表达增加，NF-κB蛋白表达减少，给予PPARγ抑制剂GW9662后四妙勇安汤调控关键因子和抗炎作用相应减弱。结论：四妙勇安汤通过PPARγ/NF-κB信号通路发挥抑制脂肪细胞炎症的作用。
文章目录
1 材料与方法
1.1 一般材料
1.1.1 细胞株
1.1.2 药物与试剂
1.1.3 实验仪器
1.2 方法
1.2.1 四妙勇安汤冻干粉的制备
1.2.2 3T3-L1前脂肪细胞培养与诱导分化
1.2.3 油红O染色鉴定脂肪细胞分化成熟
1.2.4 CCK-8法检测四妙勇安汤冻干粉不同浓度下的细胞活力
1.2.5 脂肪细胞炎症模型制备和实验分组
1.2.6 Western blot检测脂肪细胞内IL-6、NLRP3、PPARγ、NF-κB、LXRα、GLUT4蛋白表达情况
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 3T3-L1细胞成功诱导分化为脂肪细胞
2.2 不同浓度四妙勇安汤对细胞活力的影响
2.3 四妙勇安汤对脂肪细胞炎症因子IL-6和炎症小体NLRP3蛋白表达的影响
2.4 四妙勇安汤对脂肪细胞PPARγ、NF-κB p65蛋白表达的影响
2.5 四妙勇安汤通过激活PPARγ抑制炎症因子IL-6和炎症小体NLRP3蛋白表达
2.6 四妙勇安汤对脂肪细胞LXRα、GLUT4蛋白表达的影响
3 讨论
