摘要:为了推进三褶虾脊兰(Calanthe triplicata)基因表达模式的研究,使用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder等4种算法在整花、花部各结构和混合样品中鉴定和评估了9个候选内参基因。结果显示,尽管各处理之间内参基因的稳定性排名略有差异,但UBQ1和UBQ2表现最为稳定。通过RT-qPCR扩增了与花发育相关的4个靶基因,结果佐证了UBQ1和UBQ2是研究三褶虾脊兰花发育基因表达的最佳内参基因。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 RNA提取及cDNA链合成
1.3 候选内参基因的鉴定及引物设计
1.4 RT-qPCR扩增
1.5 候选内参基因表达稳定性分析
1.6 候选内参基因的验证
2 结果与分析
2.1 引物特异性检测及PCR扩增效率
2.2 候选内参基因的表达水平
2.3 候选内参基因表达的稳定性
2.3.1 geNorm分析
2.3.2 NormFinder分析
2.3.3 BestKeeper分析
2.3.4 Refinder分析
2.4 内参基因稳定性的验证
3 讨论