摘要:目的:建立一种快速且精准的方法,以确定水解乳蛋白婴幼儿配方粉的免疫反应性。方法:首先采用直接免疫斑点印迹法,利用牛奶过敏患儿血清初步评估待测样品的免疫反应性;然后通过间接竞争免疫斑点印迹法以市售普通牛奶粉为阳性对照,评估水解乳蛋白婴幼儿配方粉与血清免疫球蛋白E(IgE)的结合能力;最后采用间接和间接竞争酶联免疫检测法,以佐证免疫斑点印迹结果。结果:部分水解乳蛋白婴配粉仍可以结合IgE以诱发过敏反应,而深度水解乳蛋白婴配粉不具有免疫反应性。免疫斑点印迹和酶联免疫检测评价免疫反应性结果显著且一致。结论:免疫斑点印迹技术操作性强,周期短,成本低,结果可靠,为利用较难获取的婴幼儿过敏患儿血清初步评估乳蛋白产品致敏性提供了新思路。
文章目录
1材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 主要仪器
1.3 试验方法
1.3.1 凯氏定氮测定蛋白质含量
1.3.2 直接免疫斑点印迹
1.3.3 间接竞争免疫斑点印迹
1.3.4 间接ELISA
1.3.5 间接竞争ELISA
1.4 数据处理
2结果与分析
2.1 直接免疫斑点印迹法结果分析
2.2 间接竞争免疫斑点印迹法结果分析
2.3 ELISA结果分析
3讨论
4 结论