摘要:干旱严重影响作物的生长和产量,植物根系的结构及分布情况是植物响应干旱胁迫的关键因素。高粱作为一种耐旱性较强的作物,挖掘其抗旱相关基因对于作物抗旱改良具有重要的作用。本研究在高粱中克隆得到深根基因SbDRO1,对其进行生物信息学分析,并在拟南芥中进行功能验证。结果表明,SbDRO1基因全长759 bp,编码252个氨基酸;在拟南芥中过表达SbDRO1能够显著提高拟南芥在干旱条件下的存活率,且转基因拟南芥的根系相对野生型明显发达。进一步研究发现,涉及生长素合成、极性运输以及抗逆相关基因的表达量在转基因拟南芥中相对于野生型显著提高,这或许是SbDRO1基因提高转基因拟南芥抗旱性的主要分子机理。研究结果为农作物抗旱改良提供潜在的基因资源。
文章目录
1 材料与方法
1.1 植物材料与培养条件
1.2 载体,菌株
1.3 基因的筛选
1.4 生物信息学分析
1.5 全长cDNA的克隆
1.6 表达载体的构建
1.7 转基因拟南芥的获得及鉴定
1.8 转基因拟南芥的抗旱鉴定
1.9 胁迫应答基因的表达分析
2 结果与分析
2.1 SbDro1基因的生物信息学分析
2.2 不同物种间DRO1蛋白同源性分析
2.3 高粱中SbDRO1基因的克隆
2.4 SbDRO1过表达载体的构建
2.5 转SbDRO1基因拟南芥的获得
2.6 转SbDRO1基因拟南芥抗旱性鉴定
2.7 SbDRO1转基因拟南芥中抗逆相关基因的表达分析
3 讨论与结论