摘要：目的：旨在探讨《古今录验》续命汤通过HIF-1α/HK2通路调控缺血性卒中糖酵解的作用机理。方法：72只SD大鼠随机平均分为假手术对照组、模型对照组、续命汤10.2、20.5、41.0 g/kg组和二甲双胍45 mg/kg组。造模后各组按照相应给药方法灌胃3 d后取材。用mNSS法、TTC染色评价脑损伤情况；HE染色和尼氏染色进行病理形态学观察；免疫荧光单标法检测GLUT1、PFK1蛋白的表达；qRT-PCR和蛋白免疫印迹法检测HIF-1α、HK2、PDK1、LDHA、PKM2 mRNA或蛋白的表达；ELISA法检测ATP、丙酮酸、乳酸含量。结果：与正常对照组比较，模型对照组的mNSS评分、脑梗死体积、HIF-1α、HK2、LDHA、PDK1、PKM2、GLUT1、PFK1蛋白或mRNA表达、丙酮酸、乳酸含量明显升高（P＜0.01），ATP含量明显降低（P＜0.01），神经元排列紊乱、胞核固缩，尼氏体数目减少；与模型对照组比较，续命汤20.5、41.0 g/kg组和二甲双胍组能明显改善神经功能评分、降低HIF-1α、HK2及PDK1、LDHA、PKM2、GLUT1、PFK1蛋白或mRNA表达水平及丙酮酸、乳酸含量（P＜0.01或者P＜0.05），升高ATP含量（P＜0.01），同时神经元形态较规则、排列较整齐，尼氏体数目增多。结论：《古今录验》续命汤能够抑制缺血性卒中后糖酵解水平，改善神经功能，可能与调控HIF-1α/HK通路有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验药物
1.2 动物
1.3 试剂
1.4 仪器
1.5 方法
1.5.1 动物造模、分组及给药
1.5.2 神经功能评分
1.5.3 TTC染色观察脑梗死体积
1.5.4 HE、尼氏染色观察皮质区脑组织病理形态学变化
1.5.5免疫荧光法检测各组大鼠皮质区脑组织GLUT1、PFK1蛋白表达
1.5.6 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测各组大鼠皮质区脑组织HIF-1α、HK2、PDK1、LDHA、PKM2 mRNA表达
1.5.7 蛋白免疫印迹（WB）法检测各组大鼠皮质区脑组织HIF-1α、HK2、PDK1、LDHA、PKM2蛋白表达
1.5.8 ELISA法检测各组大鼠脑组织ATP、乳酸、丙酮酸含量
1.5.9 统计方法
2 结果
2.1 《古今录验》续命汤对MCAO大鼠mNSS评分的影响
2.2 《古今录验》续命汤对MCAO大鼠脑梗死体积的影响
2.3 《古今录验》续命汤对MCAO大鼠HE染色、尼氏染色的影响
2.4《古今录验》续命汤对MCAO大鼠缺血侧皮质区GLUT1、PFK1蛋白表达的影响
2.5 《古今录验》续命汤对MCAO大鼠缺血侧皮质区HIF-1α、HK2、PDK1、LDHA、PKM2 mRNA表达的影响
2.6 《古今录验》续命汤对MCAO大鼠缺血侧皮质区HIF-1α、HK2、PDK1、LDHA、PKM2蛋白表达的影响
2.7 《古今录验》续命汤对MCAO大鼠缺血侧皮质区ATP、乳酸、丙酮酸含量的影响
3 讨论
4 结论
