摘要：目的探讨眼针联合尾灸对脑卒中后认知功能障碍大鼠行为学、海马的影响和可能起效机制。方法 75只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组（15只）和造模组（60只）。造模组采用改良线栓法复制大脑中动脉闭塞模型，假手术组仅暴露右侧颈动脉。造模后通过Morris水迷宫实验筛选脑卒中后认知功能障碍大鼠48只，采用随机数字表法分为模型组、眼针组、尾灸组、眼针+尾灸组，每组12只。假手术组、模型组仅捆绑，不予任何干预；眼针组取双侧“肝区”“肾区”“心区”“脾区”，留针30min，每日1次；尾灸组艾灸“长强”和尾尖之间区域，温和灸20min，每日1次；眼针+尾灸组同时给予上述眼针、尾灸干预。干预7d后进行大鼠行为学检测；苏木素-伊红染色观察海马病理学变化；比色法检测海马中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性；蛋白质印迹法检测大鼠海马Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（KEAP1）、磷酸甘油酸变位酶5（PGAM5）、线粒体相关凋亡诱导因子1（AIFM1）、核转录因子E相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达；实时荧光定量PCR法检测海马KEAP1、PGAM5、AIFM1、Nrf2、HO-1 mRNA表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠逃逸潜伏期延长，穿越平台次数减少（均P＜0.05）；大鼠海马CA1区神经元数量明显减少，排列紊乱，形态不规则，可见坏死的神经元；海马中SOD活性降低，MDA含量增高（均P＜0.05）；KEAP1、PGAM5、AIFM1蛋白及mRNA表达升高，Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达降低（均P＜0.05）。与模型组比较，眼针+尾灸组大鼠逃逸潜伏期缩短，穿越平台次数增加（均P＜0.05）；大鼠海马CA1区神经元丢失明显减少，细胞形态较饱满；海马中SOD活性升高，MDA含量降低（均P＜0.05）；KEAP1、PGAM5、AIFM1蛋白及mRNA表达降低，Nrf2、HO-1蛋白及mRNA表达升高（均P＜0.05）。结论 眼针联合尾灸可治疗脑卒中后认知功能障碍大鼠，其机制可能是通过减轻海马氧化应激损伤和氧死亡，从而改善海马神经元损伤程度，提高脑卒中后大鼠的认知能力。
文章目录
1 材料
1.1 动物
1.2 伦理审查
1.3 主要试剂和仪器
2 方法
2.1 分组及造模
2.2干预
2.3 取材
2.4 检测指标
2.4.1 Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力
2.4.2 HE染色观察海马病理状态
2.4.3 分光法检测大鼠海马MDA含量、SOD活性
2.4.4 蛋白质印迹法检测海马KEAP1、PGAM5、AIFM1、Nrf2、HO-1蛋白表达
2.4.5 实时荧光定量PCR法检测海马KEAP1、PGAM5、AIFM1、Nrf2、HO-1 mRNA表达
2.5 统计方法
3结果
3.1各组大鼠Morris水迷宫实验结果比较
3.2各组大鼠海马CA1区病理组织变化
3.3各组大鼠海马MDA含量、SOD活性结果比较
3.4各组大鼠海马KEAP1、PGAM5、AIFM1、Nrf2、HO-1蛋白表达结果比较
3.5各组大鼠海马KEAP1、PGAM5、AIFM1、Nrf2、HO-1 mRNA表达结果比较
4 讨论
