摘要：目的 基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路研究炎调方保护脓毒症急性胃肠损伤(AGI)大鼠的作用机制。方法 共选取90只SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、炎调方高剂量(29.6g/kg)组、中剂量(14.8g/kg)组和低剂量(7.4g/kg)组,每组16只。除假手术组外,均建立脓毒症AGI模型。用药后观察大鼠生存率;对大鼠的肠道肌电活动情况以及肠道内大肠埃希菌、双歧杆菌、乳酸杆菌的含量进行了测定;用苏木素-伊红染色(HE)法测定各组大鼠肠黏膜组织的病理改变;采用ELISA法测定TNF-α、IL-6的含量;免疫组化测定Claudin-1、ZO-1蛋白含量;采用QRT-PCR法对HMGB1、RAGE的mRNA表达情况进行检测。结果 与模型组对比,随着炎调方剂量增加,各组大鼠生存率、肠道平滑肌的慢波频率与振幅、肠黏膜的厚度与绒毛高度、肠道内双歧杆菌与乳酸杆菌的含量、回肠组织Claudin-1、ZO-1蛋白的表达均有显著提升(P<0.05)。同时,大鼠血清中的TNF-α、IL-6水平、肠道大肠杆菌含量、以及HMGB1与RAGE的mRNA表达量均有显著下降(P<0.05),差异存在统计学意义(P<0.05)。结论 炎调方具有改善脓毒症AGI大鼠肠黏膜损伤、抑制炎症反应和恢复肠道内环境稳态的能力,这可能与炎调方通过HMGB1/RAGE信号轴来调节肠道屏障功能有关。
文章目录
1 材料与仪器
1.1 实验动物
1.2 主要试剂与仪器
2 方法
2.1 造模及分组
2.2 观察大鼠存活率
2.3 肠道肌电活动检测
2.4 检测肠道菌群
2.5 收集标本
2.5.1 血标本
2.5.2 小肠标本
2.6 ELISA测定
2.7 HE染色
2.8 免疫组织化学染色法
2.9 Real-time PCR法检测HMGB1和RAGE mRNA表达情况
2.10 统计学分析
3 结果
3.1 脓毒症AGI大鼠生存率的比较
3.2 各组脓毒症AGI大鼠小肠黏膜组织的比较
3.3 各组脓毒症AGI大鼠血清炎症因子水平
3.4 各组脓毒症AGI大鼠肠道菌群的比较
3.5 各组脓毒症AGI大鼠肠道平滑肌电活动的情况
3.6 各组脓毒症AGI大鼠机械屏障功能相关蛋白水平的比较
3.7 各组脓毒症AGI大鼠肠黏膜中HMGB1和RAGE mRNA表达情况
4 讨论
