摘要：【目的】蛋白酶K(PRK)可有效去除羊毛鳞片层，防止羊毛毡缩，在纺织行业具有巨大的应用潜力。林伯氏白色念球菌来源的蛋白酶K(TPRK)应用属性较好，但其自身的表达量偏低，无法满足工业生产的需求。【方法】利用毕赤酵母表达系统对tprK基因进行异源表达，首次分析了影响蛋白质折叠和质量控制的分子伴侣Ssa1、Erj5、Sil1、Hac1、Kar2、Lhs1和Ydj1分别过表达对TPRK的表达量和酶活力的作用，并对TPRK处理的羊毛纤维效果进行分析。【结果】TPRK在毕赤酵母GS115中表达，其最适反应条件为65℃、pH 9.0，且具有良好的热稳定性和pH稳定性。过表达ssa1、hac1、erj5和sil1基因的重组菌株酶活分别提升了36.8%、20.0%、17.7%和14.8%。5 L发酵罐进行高密度发酵，诱导72 h后，TPRK的酶活达到77 471.99 U/mL。在羊毛水解应用中TPRK可水解羊毛鳞片内层使鳞片逐渐剥落，起到剥鳞效果，并且最适水解条件为：TPRK添加量为300 U/mL、反应温度55℃、pH 9.0和反应时间2 h。【结论】过表达分子伴侣Ssa1能够有效提升TPRK的表达量，利用该TPRK处理羊毛纤维，可有效去除羊毛鳞片层，而对羊毛核心皮质层造成的损伤较小。
