摘要：本研究旨在探讨不同辐照剂量的富硒木耳多糖(Se-enriched A.Auricularia Polysaccharide， SAAP)对1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus， T1DM)小鼠的保护作用。本实验对富硒木耳进行60Co-γ射线辐照处理，随后进行多糖的提取，采用响应面法对SAAP的最佳提取条件进行优化，通过比较SAAP在不同辐照剂量下的降血糖作用，选择最佳辐照剂量进行降血糖研究。通过注射链脲佐菌素(Streptozotocin， STZ)建立C57BL/6 T1DM小鼠模型，评价其空腹血糖值(Fasting blood glucose， FBG)、口服葡萄糖耐量(Oral glucose test， OGTT)以及SAAP对T1DM小鼠糖脂代谢和氧化应激的调节作用。结果表明，经响应面优化，SAAP的最佳提取条件为：液料比37.98:1 mL/g，提取温度97.94℃，提取时间3.42 h，得到SAAP含量为0.73 mg/g。SAAP可以改善T1DM小鼠多饮多食症状，对其体重增长具有显著的恢复效果(P<0.05)；SAAP能够调节T1DM小鼠的血糖水平，表现为FBG和OGTT降低；SAAP能够显著降低T1DM小鼠的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量以及丙二醛(MDA)活性(P<0.05)，增加超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)以及过氧化氢酶(CAT)水平；SAAP可以减轻T1DM所带来的炎症反应，即β干扰素(IFN-β)、白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素6受体(IL-6R)和肿瘤坏死因子(TNF-γ)水平降低，并与其辐照剂量成正比；SAAP通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路从而对T1DM小鼠起到保护作用，且辐照剂量为10 kGy时抑制效果最佳。本研究为SAAP在治疗T1DM引起的炎症反应和氧化应激的应用提供理论依据和技术参考。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料、仪器与动物
1.1.1 材料
1.1.2 仪器
1.1.3 动物协议
1.2 实验方法
1.2.1 辐照处理
1.2.2 SAAP的提取
1.2.3 多糖含量的测定
1.2.4 单因素实验
1.2.5 响应面试验
1.2.6 小鼠模型建立
1.2.7 小鼠分组
1.2.8 小鼠基础指标的测定
1.2.9 小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的测定
1.2.10 小鼠脂质代谢及氧化应激指标的测定
1.2.11 小鼠炎症因子指标的测定
1.2.12 蛋白免疫印迹分析
1.3 数据处理
2 结果与分析
2.1 单因素实验结果
2.2 响应面试验结果
2.2.1 试验设计与结果
2.2.2 各因素间交互作用的响应面分析
2.2.3. 验证实验
2.3 SAAP对小鼠基础指标的影响
2.4 SAAP对小鼠空腹血糖值和葡萄糖耐量的影响
2.5 SAAP对小鼠脏器系数的影响
2.6 SAAP对小鼠脂质代谢和氧化应激的影响
2.7 SAAP对小鼠炎症因子的影响
2.8 SAAP对PI3K/AKT/mTOR表达的影响
3 结论
