摘要：为提高油茶饼粕的附加值，采用复合蛋白酶酶解油茶饼粕蛋白，酶解产物通过超滤、凝胶层析分离纯化，LC-MS/MS序列鉴定结合PeptideRanker数据库筛选，获得具有较高抗氧化活性的肽段。探究不同温度、pH值、金属离子以及体外模拟胃肠道消化对抗氧化肽活性的影响。结果表明：酶解产物经超滤和Sephadex G-25凝胶柱逐级分离后，得到4个组分(F1～F4)，F4组分的ABTS和DPPH自由基清除率最高，分别为(67.56±0.32)%和(52.40±1.64)%。经氨基酸序列鉴定、PeptideRanker预测与活性验证，得到3条抗氧化肽，分别为LCDQCPPHA(LC-9)、ATNPPCCQP(AT-9)、TSCSSPSYPFQ(TS-11)。AT-9和LC-9具有较好的热稳定性，且在pH 3～9范围，ABTS和DPPH自由基清除活性均未发生显著改变。5种金属离子中，Cu2+对3条肽活性的影响最为显著，当Cu2+浓度为2 mmol/L时，LC-9的ABTS和DPPH清除活性保持率分别为(23.47±0.61)%和(44.57±0.58)%。此外，经体外模拟胃肠道消化后，AT-9的抗氧化活性保持率最高，ABTS和DPPH清除活性保持率均高于90%。3条肽中AT-9具有较强的抗氧化活性和良好的稳定性，可应用于食品领域。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 仪器与设备
1.3 油茶饼粕蛋白提取
1.4 油茶饼粕蛋白的水解
1.5 自由基清除活性测定
1.5.1 DPPH自由基清除活性
1.5.2 ABTS自由基清除活性
1.5.3 自由基清除活性保持率
1.6 超滤分离
1.7 葡聚糖凝胶分离
1.8 LC-MS/MS氨基酸序列测定
1.9 抗氧化肽筛选
1.10 抗氧化肽的稳定性
1.10.1 温度对抗氧化肽活性的影响
1.10.2 pH对抗氧化肽活性的影响
1.10.3 金属离子对抗氧化肽活性的影响
1.10.4 体外模拟胃肠道消化对抗氧化肽活性的影响
1.11 数据处理
2 结果与分析
2.1 超滤分离结果
2.2 凝胶分离结果
2.3 抗氧化肽的鉴定与筛选
2.4 抗氧化肽的稳定性分析
2.4.1 温度对抗氧化肽活性的影响
2.4.2 pH对抗氧化肽活性的影响
2.4.3 金属离子对抗氧化肽活性的影响
2.4.4 体外模拟胃肠道消化对抗氧化肽的影响
3 结论
