摘要：研究通过建立脾虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）模型，采用液相芯片对大鼠血清中炎性细胞因子进行高通量检测，同时以HE染色对结肠组织进行炎症分级评分，验证半夏泻心汤（Banxia Xiexin Tang，BXT）对脾虚型UC的药理作用。随后利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）对BXT入血成分进行分析，并结合网络药理学，探究BXT治疗脾虚型UC的作用机制。结果显示，UC能够增加大鼠血清中细胞因子白细胞介素-1α（interleukin-1α，IL-1α）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）、干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）表达水平；BXT可降低血清炎性细胞因子含量，且BXT高剂量组（20 g/kg）下降最明显，无明显炎细胞浸润，表明BXT对脾虚型UC具有一定的治疗作用。大鼠血清中发现入血成分共20个；网络药理学筛选出BXT治疗UC相关靶点87个，涉及炎症反应、炎症反应调节、微生物反应等生物过程，参与了IL-17、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF等信号通路。综上可知，BXT治疗脾虚型UC可能与抑制肠道炎症、调节肠道微生物及保护肠道屏障等多个途径相关，从而达到治疗UC效果。
文章目录
1 材料与方法
1.1 动物
1.2 药物与主要试剂
1.3 仪器
1.4 分析工具
1.5 方法
1.5.1 半夏泻心汤的制备
1.5.2 脾虚型UC大鼠造模、分组与给药
1.5.3 病变活动指数评分
1.5.4 HE染色结肠组织病理学及炎症分级评分
1.5.5 炎症因子检测
1.5.6 入血成分检测实验动物分组及给药
1.5.7 对照品溶液制备
1.5.8 水煎液样本处理
1.5.9 血清样本采集和处理
1.5.10 检测条件
1.5.11 网络药理学分析
1.5.11.1 半夏泻心汤有效成分靶点的获取
1.5.11.2 溃疡性结肠炎靶点的获取
1.5.11.3 半夏泻心汤与溃疡性结肠炎的交集靶点
1.5.11.4 蛋白质互作网络构建
1.5.11.5 半夏泻心汤有效成分核心靶点的筛选
1.5.11.6 GO富集分析、KEGG通路分析及“入血成分-作用靶点-通路”网络的构建
1.5.11.7 分子对接
1.6 统计学分析方法
2 结果
2.1 半夏泻心汤抗脾虚型溃疡性结肠炎验证
2.1.1 DAI评分结果
2.1.2 HE染色结肠组织病理学及炎症分级评分结果
2.1.3 半夏泻心汤对各组模型大鼠血清炎症因子表达水平的影响
2.2 半夏泻心汤入血成分
2.3 网络药理学分析
2.3.1 半夏泻心汤有效成分靶点预测结果
2.3.2 溃疡性结肠炎预测结果
2.3.3 半夏泻心汤活性成分与溃疡性结肠炎潜在靶点交集
2.3.4 半夏泻心汤与溃疡性结肠炎交集靶点PPI网络图
2.3.5 半夏泻心汤活性成分核心靶点的筛选
2.3.6 GO富集分析和KEGG通路分析
2.3.7 “入血成分-作用靶点-通路”网络的构建
2.3.8 关键成分与核心靶点分子对接结果
3 讨论与结论
