摘要:为提高不结球白菜抗坏血酸含量,以不结球白菜品种‘黄玫瑰’为材料,选择不结球白菜GGP基因的uORF序列为靶标,构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体,通过发根农杆菌介导的遗传转化方法获得了4种不同基因编辑类型‘黄玫瑰’GGP基因uORF的编辑植株,检测再生植株的T1代纯合绿色植株的抗坏血酸含量,再与空载转基因再生植株相比,抗坏血酸含量提高了26.2% ~ 67.1%。这为利用CRISPR/Cas9系统在不结球白菜中开展基因编辑和生物育种研究提供了依据。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 sgRNA的设计与CRISPR/Cas9载体的构建
1.3 农杆菌介导的遗传转化
1.4 转基因植物PCR鉴定
1.5 基因编辑位点鉴定
1.6 抗坏血酸含量测定
2 结果与分析
2.1 植株栽培与Cas9基因检测
2.2 CRISPR/Cas9介导的基因编辑结果
2.3 T1代纯合绿色植株抗坏血酸含量比较
3 讨论