摘要：本研究旨在从健康成年猪新鲜粪便中分离筛选可用于改善仔猪腹泻的潜在益生菌菌株，并对筛选菌株的生长性能、耐酸、耐人工胃肠液、抗生素敏感性、体外抑菌和免疫调节等益生特性进行测定。结果显示，成功分离获得一株罗伊氏黏液乳杆菌（Limosilactobacillus reuteri），命名为HN-1菌株。该筛选菌株在37 ℃培养2～8 h处于对数生长期，培养14 h后，其培养液的pH值下降至4.36，说明HN-1菌株具有较强的产酸能力。HN-1菌株在pH=3.0条件下培养2 h后的存活率为49.5%，经人工胃肠液处理后，存活率为53%，说明其具有较强的抗逆能力。对抗生素的敏感性试验结果显示，HN-1菌株对阿莫西林、青霉素、氨苄西林、头孢噻吩、头孢噻肟、庆大霉素、新生霉素和多西环素高度敏感。体外抑菌试验结果显示，该菌株对金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌均具有良好的抑制作用。另外，HN-1菌株与IPEC-J2细胞共孵育6 h可显著抑制促炎细胞因子IL-8（P＜0.001）、TNF-α（P＜0.01）和IL-1β（P＜0.01）的表达，说明该菌株具有一定的免疫调节能力。小鼠体内安全性试验结果显示，HN-1菌株具有良好的安全性。综上所述，分离的猪源罗伊氏黏液乳杆菌HN-1益生特性良好，可为后续研制用于防治仔猪腹泻的益生菌制剂提供备选菌株。
文章目录
1 材料与方法
1.1 样品、细胞及实验动物
1.2 菌株、主要试剂和仪器
1.3 菌株的分离与纯化
1.4 溶血性试验
1.5 生化鉴定
1.6 分子生物学鉴定
1.7 生长特性与产酸特性
1.8 抗逆性检测
1.8.1 对酸的耐受性试验
1.8.2 对人工胃肠液的耐受性试验
1.9 抗生素敏感性检测
1.10 体外抑菌作用
1.11 免疫调节作用
1.12 小鼠体内安全性试验
1.13 数据统计与分析
2 结果与分析
2.1 分离菌株形态学观察及溶血试验
2.2 生化鉴定
2.3 分子生物学鉴定
2.4 生长性能与产酸特性
2.5 抗逆性试验
2.5.1 对酸的耐受性
2.5.2 对人工胃
