摘要:【目的】对具有多项促生功能的水稻内生菌株Acinetobacter soli促生和定殖能力进行测定和解析,发掘优质内生菌资源,丰富水稻内生菌资源库并为 Acinetobacter soli 促生菌的应用提供参考依据。【方法】采用平板划线法从水稻根、茎、叶组织中分离纯化内生菌。用功能平板测定内生菌的促生功能[解钾、固氮、溶磷、产铁载体以和分泌IAA],通过形态特征、生理生化特性以及16S rRNA分子序列进行菌种鉴定,生长曲线和不同碳氮源培养基优化菌株培养条件发酵培养基优化促生菌生长,通过生物膜、果胶酶的形成能力测定和定殖实验研究定殖机制和定殖能力;通过种子萌发水稻幼苗促生评估促生效果【结果】在水稻叶片内得到菌株JKDY-3,该菌解钾黄色晕圈直径为26.0mm、溶磷圈为13.7mm、产铁载晕圈为17.7 mm,IAA分泌量为58.44 mg/L,兼具固氮能力。综合菌株形态学、生理生化结果和和16S rRNA分子序列分析,菌株JKDY-3鉴定为不动杆菌(Acinetobacter soli)。菌株生长对数期在2-14h,培i养基的最佳碳源为麦芽糖、最佳氮源分别为酵母浸粉。该菌有较强形成生物膜的能力OD570为0.196,能产生果胶酶,接种7d后在水稻根、茎、叶中定殖量为3.75×103 CFU/g、7.26×103 CFU/g、6.76×103 CFU/g。在种子萌发实验发现,菌株处理后水稻种子发芽势、发芽指数、活力指数、芽长及根长均相比对照组显著提高,分别提高了12%、16%、30%、28%、26%。试管促生实验中,在难溶钾环境下与对照组相比,水稻幼苗地下部分干重增加了35%(P<0.05),显著促进水稻幼苗根系生长。【结论】水稻内生菌JKDY-3具有促生功能、可定殖于水稻内,可丰富促生菌种类,为开发水微生物肥料研究提供优良的菌株资源。
文章目录
0 引言
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 样品来源
1.1.2 培养基配方
1.1.3 试剂
1.2 内生菌的分离和筛选
1.3 促生能力测定
1.3.1 解钾能力测定
1.3.2 溶磷能力测定
1.3.3 产铁载体能力测定
1.3.4 固氮能力测定
1.3.5 IAA 分泌能力测定
1.4 筛选菌株的鉴定
1.4.1 形态特征观察
1.4.2 生理生化测试
1.4.3 分子生物学鉴定
1.5碳源和氮源对菌株生长的影响
1.5.1 生长曲线测定
1.5.2 碳源对细菌的影响
1.5.3 氮源对细菌的影响
1.6 菌株定殖能力检验
1.6.1 生物膜试验