摘要:本文利用网络药理学、分子对接与分子动力学模拟的方法,探究槲皮素(Quercetin,QR)对鹅免疫功能影响的作用机制,并通过动物饲养试验进行验证。在饲养试验中,选取72只1日龄体重为(83.52±3.27)g的籽鹅,预饲7 d,于第8天将鹅随机分为4组,分别为对照组、QR组、脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)组以及QR+LPS组,每组3个重复,每个重复6只鹅。对照组和LPS组饲粮中不添加QR,QR组和QR+LPS组饲粮中添加450mg/kg QR;分别于16、18、20日龄08:00对LPS组与QR+LPS组试验鹅进行LPS刺激,对照组与QR组试验鹅注射生理盐水。于21日龄屠宰采样。结果表明:1)预测了36个鹅免疫应激的潜在靶点,其中BCL2、CASP3、IL-6和STAT3为核心靶点,其作用机制可能与P53信号通路、细胞凋亡信号通路、FOXO信号通路等有关。2)QR可通过上述4个核心靶点发挥作用。3)添加QR可显著缓解LPS引起的BCL2的mRNA表达量显著下降,CASP3与IL-6的mRNA表达量显著上升。本研究通过结合网络药理学、分子动力学模拟、分子对接和饲养试验,研究了QR对鹅免疫功能的影响,为QR在鹅生产中的应用提供了参考。
文章目录
1 材料与方法
1.1 QR对应靶点获取
1.2 免疫应激相关靶点收集
1.3 槲皮素缓解鹅免疫应激的靶点整理
1.4 构建与分析蛋白质相互作用网络
1.5 基因功能及通路富集分析
1.6 分子对接
1.7 分子动力学模拟
1.8 饲养试验
1.8.1 试验材料
1.8.2 试验设计与饲养管理
1.8.3 荧光定量PCR检测
1.9 统计分析
2 结 果
2.1 QR缓解鹅免疫应激的靶点整理
2.2 构建与分析蛋白质相互作用网络
2.3 GO生物功能富集分析
2.4 KEGG通路富集分析
2.5构建信号通路网络
2.6 分子对接结果