摘要：目的 研究苦参碱（matrine，MT）的肝脏毒性作用及机制。方法 将L02细胞与小鼠暴露于MT后，检测MT对肝细胞活力、活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平、线粒体功能、细胞凋亡及胱硫醚β合酶（cystathionine β-synthase，CBS）/硫化氢(H2S)/ATP合成酶α亚基（ATP synthase F1 subunit alpha，ATP5A）通路的影响。结果 与对照组相比，MT能抑制L02细胞存活率、降低CBS水平与ATP5A硫巯基化（SH-ATP5A）、增加ROS、降低线粒体膜电势、抑制H2S与ATP生成，最终活化caspase-3，诱导细胞凋亡（P<0.05）。此外，MT能损伤小鼠肝功能、使肝脏病理改变，伴有CBS与SH-ATP5A水平下降、H2S与ATP生成减少，以及caspase-3活化（P<0.05）。蛋氨酸或硫氢化钠均可通过提高胞内H2S水平，减轻MT对L02细胞及小鼠肝脏的毒性作用（P<0.05）。结论 MT通过抑制CBS/H2S/ATP5A通路活性，使ROS堆积、线粒体功能障碍、caspase-3活化，引起肝细胞凋亡。提高胞内H2S水平，能增加ATP5A的S-巯基化修饰，从而减轻MT的肝毒性。
文章目录
1 材料
1.1 细胞株
1.2 实验动物
1.3 药物与试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 细胞培养与给药
2.2 动物分组与给药
2.3 血生化分析及肝组织病理学检测
2.4 细胞存活率检测
2.5 活性氧、线粒体膜电位及细胞凋亡率检测
2.6 H2S、ATP含量及caspase-3酶活性检测
2.7 Western blot检测蛋白含量
2.8 统计学分析
3 结果
3.1 MT引起肝细胞L02氧化应激、线粒体功能障碍与细胞凋亡
3.2 MT抑制肝细胞CBS/H2S/ATP5A通路
3.3 激活CBS/H2S/ATP5A通路能减轻MT诱导的L02细胞毒性
3.4 激活CBS/H2S/ATP5A通路能减轻MT诱导的小鼠肝毒性
4 讨论
