摘要:目的:观察小青龙汤对变应性鼻炎大鼠铁死亡的影响,并对其具体作用机制进行探讨。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、氯雷他定组(0.9 mg·kg-1)、小青龙汤低、中、高剂量组(2.14、4.28、8.56 g·kg-1),每组10只。给药治疗2周后,观察6组大鼠行为学评分,苏木素-伊红(HE)染色观察鼻黏膜组织形态改变,普鲁士蓝染色观察铁沉积情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组活性氧(ROS)、亚铁离子(Fe2+)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH);免疫荧光法检测鼻黏膜组织ROS含量和沉默信息调节因子1(SIRT1)表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测鼻黏膜组织SIRT1、铁死亡相关蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化蛋白53(p53)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠行为学评分均显著升高,鼻黏膜损伤严重,铁沉积显著增加,GSH和SOD水平显著降低,MDA、Fe2+、ROS荧光面积比均显著升高(P<0.05),GPX4、SLC7A11和SIRT1蛋白表达水平均降低,p53和ACSL4蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,小青龙汤各剂量组均可降低大鼠行为学评分,鼻黏膜损伤显著改善,铁沉积显著降低 (P<0.05),GSH和SOD水平显著升高,MDA、Fe2+、ROS荧光面积比均显著降低(P<0.05),GPX4、SLC7A11和SIRT1蛋白表达水平均升高,p53和ACSL4蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:小青龙汤可能通过调控SIRT1/SLC7A11信号通路,抑制脂质过氧化和铁死亡,从而达到治疗变应性鼻炎的目的。
文章目录
1 资料
1.1 动物
1.2 药物
1.3 试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 动物模型制备、分组及给药
2.2 行为学评分
2.3 苏木精-伊红染色?(HE)法检测AR大鼠鼻黏膜病理改变
2.4 ?酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测AR大鼠鼻黏膜组织中Fe2+、MDA、SOD和GSH水平
2.5 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AR大鼠鼻黏膜SIRT1/SLC7A11信号通路关键蛋白表达
2.6 荧光探针法检测AR大鼠鼻黏膜组织细胞内ROS表达强度
2.7 免疫荧光法检测鼻黏膜组织中SIRT1的表达
2.8 统计学方法
3 结果
3.1 小青龙汤对AR大鼠行为学评分的影响
3.2 小青龙汤对AR大鼠鼻黏膜结构和形态等病理学变化的影响
3.3 小青龙汤对AR模型大鼠鼻黏膜氧化应激、Fe2+水平和铁沉积的影响
3.4 小青龙汤对AR模型大鼠鼻黏膜组织SIRT1/SLC7A11信号通路关键靶点表达的影响
4 讨论