摘要：菌菇来源可溶性β-葡聚糖具有良好的生物活性，为开发利用蛹虫草中的β-葡聚糖，本研究以蛹虫草子实体为原料，采用蛋白酶酶解、大孔树脂吸附、DEAE离子交换柱层析进行纯化，以脱色率及β-葡聚糖保留率进行加权评分，摸索建立最佳纯化工艺条件。对获得的β-葡聚糖进行结构分析，并研究其体外降血糖活性。结果显示：大孔树脂HPD-750具有最佳的吸附效果，其吸附最优条件为：上样流速5 mL/min、上样浓度4 mg/mL、上样体积400 mL、树脂质量40 g。利用DEAE-FF纤维素交换柱分离出两个β-葡聚糖组分CMBG-1和CMBG-2，相对分子量分别为13.57×104 Da和14.36×104 Da；均由Gal，Glc，Ara三种单糖组成，其摩尔比分别为1.28∶5.27∶1.01和0.71∶4.43∶0.80。通过刚果红分析得出CMBG-1具有三螺旋结构，而CMBG-2不具备三螺旋结构，二者对α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制率都与样品的浓度呈正相关，其对α-淀粉酶抑制的IC50分别为2.68和4.32 mg/mL，对α-葡萄糖苷酶抑制的IC50分别为2.37和3.01 mg/mL，拥有三螺旋结构的CMBG-1的降血糖活性明显高于不具备三螺旋结构的CMBG-2，在功能食品开发方面具有良好的前景。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 CMBG粗品的制备
1.2.2 蛹虫草β-葡聚糖除蛋白
1.2.3 蛹虫草β-葡聚糖脱色工艺
1.2.3.1 静态吸附法初筛树脂
1.2.3.2 吸附动力学筛选最佳树脂
1.2.3.3 单因素实验
1.2.4 DEAE交换树脂分离组分
1.2.5 β-葡聚糖含量的计算
1.2.6 CMBG的结构解析
1.2.6.1 相对分子质量测定
1.2.6.2 傅里叶红外光谱分析
1.2.6.3 单糖组成分析
1.2.6.4 刚果红染色分析
1.2.7 CMBG的降血糖活性分析
1.2.7.1 α-淀粉酶抑制活性测定
1.2.7.2 α-葡萄糖苷酶抑制活性测定
1.2.7.3 体外降血糖抑制作用类型分析
1.3 数据处理
2 结果与分析
2.1 CMBG的脱色工艺
2.1.1 大孔树脂的初筛选
2.1.1.1 大孔树脂的静态吸附
2.1.1.2 吸附动力学考察
2.1.2 大孔树脂吸附条件的单因素实验
2.2 DEAE离子交换柱层析
2.3 蛹虫草β-葡聚糖的结构解析
2.3.1 相对分子量测定
2.3.2 傅里叶红外光谱扫描
2.3.3 单糖组成分析
2.3.4 三螺旋结构分析
2.4 CMBG降血糖活性研究
2.4.1 CMBG对α-淀粉酶的抑制活性
2.4.2 CMBG对α-葡萄糖苷酶抑制活性
2.4.3 CMBG体外降血糖抑制作用类型分析
3 结论
