摘要：目的 探讨大黄灵脾方对缺血再灌注急性肾损伤（ischemia/reperfusionrenalinjury，IRI）大鼠氧化应激的调节作用。方法 将雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄灵脾低剂量组、高剂量组，每组16只。大黄灵脾组及模型组大鼠通过夹闭双侧肾蒂45min后恢复血流再灌注建立IRI模型，大黄灵脾组大鼠予大黄灵脾灌胃治疗，假手术组和模型组大鼠每天灌服蒸馏水，连续干预7天。于治疗3天、7天后各组随机处死8只大鼠留取样本检测血清肌酐、尿素氮、铁调素（hepcidin)、血清铁、肾组织铁含量、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathionePeroxidase，GSH-Px）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）；苏木精—伊红染色法（hematoxylin-eosinstaining，HE）染色法观察肾组织病理；免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法（westernblot，WB）法检测肝组织hepcidin、肾组织膜铁转运蛋白（ferroportin，FPN）表达；实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（real-timefluorescentquantitativepolymerasechainreaction，RT-qPCR）法检测肝组织hepcidinmRNA表达。结果 与模型组比较，大黄灵脾组血肌酐、尿素氮、血清铁、肾组织铁含量、MDA、IL-6含量显著降低（P<0.05）；血清hepcidin、SOD、GSH-Px含量显著升高（P<0.05）。HE染色显示，大黄灵脾组肾病理损伤明显减轻。RT-qPCR显示大黄灵脾组hepcidinmRNA表达明显高于模型组（P<0.05）；免疫组织化学和WB结果显示，大黄灵脾组hepcidin蛋白表达明显高于模型组，FPN蛋白表达明显低于模型组（P<0.05）。结论 大黄灵脾方可减轻IRI大鼠氧化应激和炎症水平，促进肾损伤修复，加速肾功能恢复；其机制可能与干预IRI铁代谢异常相关氧化应激有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物
1.1.2 药物与试剂
1.1.3 仪器
1.2 分组与造模
1.3 干预方法
1.4 检测指标与方法
1.4.1 肾功能
1.4.2 SOD、MDA、GSH-Px和IL-6含量的测定
1.4.3 铁代谢指标
1.4.4肾组织病理观察
1.4.5 免疫组织化学方法检测大鼠肝组织
1.4.6 western blot法检测hepcidin、FPN蛋白表达水平
1.4.7 实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测hepcidin mRNA表达水平
1.5 统计学方法
2 结果
2.1 对大鼠肾功能的影响
2.2 肾组织HE染色
2.3 对氧化应激、炎症水平的影响
2.4 对hepcidin、血清铁和肾组织铁含量的影响
2.5 免疫组织化学检测肾组织FPN蛋白表达水平
2.6 免疫组织化学检测hepcidin蛋白表达水平
2.7 western blot 法检测hepcidin和FPN蛋白表达水平
2.8 RT-qPCR法检测hepcidin mRNA表达水平
3 讨论
