摘要:目的:从抑制JAK/STAT信号阻抑巨噬细胞M2极化途径阐述桔梗皂苷E(PlatycosideE,PE)对博来霉素(BLM)诱导的肺纤维化模型小鼠的干预以及作用机制。方法:通过随机抽样的方式,我们把40只Balb/c小鼠划分成了五组,即空白对照组、模型组、吡非尼酮(PDF)实验组、PE高剂量组和PE低剂量组,每组8只。适应性培养后,实验组小鼠采用博来霉素鼻滴法诱导肺纤维化小鼠模型。接着,我们使用HE和MASSON染色法来研究小鼠的肺部组织的病理性变化;用ELISA技术检测小鼠血清中IL-10、IL-4、IL-17A、TNF-α的浓度;采用免疫荧光技术检测肺组织中CD206、CD11b的表达;通过蛋白免疫印记实验(WB)对JAK1、P-JAK1、STAT6、P-STAT6进行蛋白表达检测。结果:模型组的组织与空白组相比,结构扭曲,肺泡壁变厚。形成纤维化灶,其肺泡炎性分数和胶原体积分数显著增加(P<0.01)。对小鼠血清进行ELISA检测后,我们发现,与模型组相比,IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α的浓度均有所降低;免疫荧光技术检测巨噬细胞和M2型巨噬细胞标志物CD11b和CD206的表达后发现经PE处理过的CD11b和CD206荧光强度均明显降低。研究结果发现,在模型小鼠的肺部组织中,JAK1、P-JAK、STAT6、P-STAT6蛋白质表达显著升高。而在进行了PE处理之后,这些蛋白质的水平都有所减少。结论:PE能有效改善由BLM引起的小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制JAK/STAT通路阻抑巨噬细胞M2极化有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1实验动物
1.1.2药品及试剂
1.2 方法
1.2.1小鼠造模与给药
1.2.2取材及样品处理
1.2.3病理检查
1.2.4 HYP含量检测
1.2.5蛋白质印迹检测
1.2.6巨噬细胞极化及通路相关指标检测
1.2.7酶联免疫吸附法
1.3 统计学处理
2 结果
2.1 PE对BLM诱导小鼠的肺组织病理变化的影响
2.2 PE对肺纤维化小鼠的肺巨噬细胞极化的影响
2.3 PE对BLM诱导小鼠血清中IL-10、IL-4、IL-6、TNF-α的浓度变化
2.4 PE对BLM诱导小鼠的JAK1、STAT6蛋白表达量的影响
3 讨论