摘要:实验旨在研究获能物质及微流控精子分离器(MFSS)对牛性控精子的影响。在BO液中添加获能物质(空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组)对牛性控精子进行获能,比较各组性控精子活率、活力及运动参数;利用MFSS(MFSS分为入口A储精室、B培养液室和出口C运动不良精子分离室、D运动良好精子分离室4个小室)分离获能效果较好的牛性控精液,测定A、C、D各小室精子的活率、活力、密度以及运动参数,分离后的精子经JC-1染色,流式细胞仪检测各小室精子线粒体相对活性和线粒体活性均衡精子。结果表明:空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组精子获能后的精子活力、活率、运动性能均无显著差异。5 mmol/L咖啡因组经MFSS分离5 min后D室中精子活力、活率和线粒体相对活性高于A室和C室(P<0.05),精子密度低于A室(P<0.05),其他各组间差异均不显著。由此可见,获能物质咖啡因能够诱导牛精子体外获能,但作用效果不显著;MFSS能分离出高活力、高运动性能的精子,且精子的活力、运动性能与精子线粒体活性有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 主要试剂与溶液配置
1.2 实验设计
1.3 精液处理及精子质量测定
1.4 MFSS分离精子
1.4.1 MFSS原理及使用方法
1.4.2 MFSS准备
1.4.3 MFSS分离精子
1.4.4 流式细胞仪检测分析
1.5统计分析
2 结 果
2.1肝素、咖啡因对牛性控精子活率、活力的影响
2.2肝素、咖啡因对牛性控精子运动参数的影响
2.3 微流控精子分离器分离牛性控精子质量的影响
2.4微流控精子分离器分离牛性控精子运动参数的影响
2.5 微流控精子分离器分离牛性控精子线粒体活性的影响
3 讨 论
3.1肝素、咖啡因对牛性控精子活率、活力及运动参数的影响
3.2 MFSS分离牛性控精子
4 结 论