摘要：目的：观察电针“足三里”和“肺俞”穴对慢性阻塞性肺疾病（COPD）小鼠皮层肌动蛋白结合蛋白（Cortactin）、肺血管内皮细胞骨架的影响，探讨电针改善COPD炎症损伤的机制。方法：将C57BL/6小鼠随机分成正常组、模型组、电针组、Cortactin小干扰RNA（si-Cortactin）组、si-Cortactin+电针组。香烟暴露12周复制COPD小鼠模型，电针治疗前24h进行鼻腔滴注si-Cortactin，隔日电针治疗，14d后观察肺功能和病理学变化，取支气管肺泡灌洗液（BALF）、血清和肺组织，ELISA方法检测BALF和血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、胱天蛋白酶（Caspase）-3含量，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检测小鼠肺血管内皮细胞凋亡，免疫荧光双标法观察小鼠肺血管内皮细胞骨架稳定性，实时荧光定量方法（qPCR）检测肺组织Caspase-3和Cortactin mRNA表达，蛋白免疫印迹（WB）法检测肺组织内Caspase-3和Cortactin蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组用力肺活量（FVC）、第0.05秒用力呼气量(FEV0.05)、第0.1秒用力呼气量(FEV0.1)、FEV0.05占FVC比值（FEV0.05/FVC）以及FEV0.1占FVC比值（FEV0.1/FVC）指标均明显下降（P＜0.05），肺组织炎性浸润明显，血清及BALF中TNF-α和Caspase-3的含量明显增高（P＜0.001），肺组织中Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平明显增高，而Cortactin mRNA和蛋白表达明显减少（P＜0.05），肺组织中肺血管内皮细胞凋亡及细胞骨架结构破坏明显；相较模型组，电针组上述指标均明显改善（P＜0.05）；使用si-Cortactin进行干预后，si-Cortactin组上述指标均进一步加重（P＜0.05）；相较si-Cortactin组，si-Cortactin+电针组上述指标则有所改善（P＜0.05）。结论:电针减轻COPD小鼠肺组织炎性病理损伤，其作用机制可能与其上调Cortactin，稳定肺血管内皮细胞骨架，抑制细胞凋亡有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 动物与分组
1.2 主要试剂和仪器
1.3 造模方法
1.4 各组处理方法
1.5 观察指标及检测方法
1.6 统计学处理
2 结果
2.1 各组小鼠肺功能比较
2.2 各组小鼠肺组织病理形态比较
2.3 各组小鼠血清、BALF内TNF-α、Caspase-3含量的比较
2.4 各组小鼠肺血管内皮细胞凋亡情况
2.5 各组小鼠肺血管内皮细胞骨架情况
2.6 各组小鼠肺组织内Caspase-3、Cortactin mRNA水平表达比较
2.7 各组小鼠肺组织内Caspase-3、Cortactin蛋白表达比较
3 讨论
