摘要:目的:探讨中药仙茅对肺癌细胞顺铂化疗的增敏作用机制。方法:运用网络药理学和分子对接技术筛选仙茅对非小细胞肺癌的主要凋亡蛋白;CCK-8法检测细胞增殖率;蛋白印迹法检测仙茅、顺铂单用及联用后肺癌细胞(A549)中Caspase3和Caspase9蛋白表达量;流式细胞术检测细胞总凋亡率;细胞划痕和细胞侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果:100-1 500 μg/mL剂量浓度的仙茅水提液对A549细胞增殖率无明显抑制作用,联用组较顺铂单用组对A549细胞的抑制作用显著增强;与对照组相比,仙茅组、联用组Caspase3和Caspase9蛋白表达量、细胞总凋亡率以及细胞迁移侵袭抑制率显著升高,顺铂组Caspase3、Caspase9蛋白表达量、细胞总凋亡率显著升高;与顺铂单用组相比,仙茅组、仙茅联用顺铂组Caspase3和Caspase9蛋白表达、细胞总凋亡率以及细胞迁移侵袭抑制率显著升高。结论:仙茅、顺铂、仙茅联用顺铂可以诱导A549细胞凋亡,与仙茅联用增强了顺铂对A549细胞凋亡的诱导作用,其作用机制与凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase9有关。同时,联用仙茅后顺铂对A549细胞增殖率及迁移侵袭能力的抑制作用也更加显著。
文章目录
1.资料与方法
1.1仙茅、顺铂的作用靶点预测以及NSCLC相关靶点获取
1.2核心靶点筛选
1.3核心靶点GO功能和KEGG通路富集分析
1.4分子对接配体准备
1.5体外实验验证
1.5.1细胞
1.5.2药物
1.5.3主要试剂与仪器
1.5.4仙茅水煎液的制备
1.5.5细胞培养与处理
1.5.6 CCK-8检测
1.5.7蛋白印迹法检测Casepase3和Casepase9蛋白表达
1.5.8流式细胞仪分析
1.5.9细胞划痕实验
1.5.10细胞侵袭实验
1.5.11统计学分析
2.结果
2.1仙茅、顺铂作用靶点与NSCLC相关靶蛋白的获取结果
2.2核心靶点筛选
2.3 GO功能和KEGG通路富集分析结果
2.4分子对接验证结果
2.5实验验证结果
2.5.1不同浓度仙茅、顺铂以及仙茅联用顺铂对A549细胞增殖作用的影响
2.5.2仙茅、顺铂以及仙茅联用顺铂对A549细胞中Caspase3和Caspase9的表达的影响
2.5.3仙茅、顺铂以及仙茅联用顺铂对A549细胞凋亡的影响
2.5.4仙茅、顺铂以及仙茅联用顺铂对A549细胞迁移与侵袭的影响
3.讨论