摘要：目的 探讨高压氧（HBO）治疗对高原脱习服（HADA）模型小鼠脑组织病理损伤及能量代谢的影响。方法 雄性昆明小鼠36只，采用随机数字表法分为3组：正常对照组（NC组）、HADA组、HBO组，按照HBO治疗时间又分为2个亚组（1、3d组），每个亚组6只小鼠。使用小动物低压舱模拟海拔5000m高原环境，舱内饲养14d出舱后进行旷场实验评价小鼠HADA模型，八臂迷宫实验评价各组小鼠的行为学改变；出舱后连续进行3dHBO治疗；小鼠麻醉灌注后取1、3d脑组织观察病理学改变，采用HE染色观察脑组织皮层和海马的病理学改变，Nissl染色观察脑组织神经细胞损伤情况，免疫荧光染色观察脑组织葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）阳性细胞的表达情况。结果 脱习服模型小鼠在旷场实验中的中心区域运动距离及停留时间、穿格次数、运动总距离均较NC组小鼠显著减少（P<0.05）。八臂迷宫实验结果显示HADA组小鼠工作记忆错误、参考记忆错误、错误总数较NC组明显增高；HBO治疗1d后上述指标明显降低（P<0.05）。HE染色可见HADA组小鼠脑组织皮层及海马齿状回区神经细胞出现明显的变性坏死。Nissl染色可见HADA组小鼠脑组织Nissl体数量减少甚至溶解，并且形态异常；模型小鼠脑组织1d的病理损伤较3d严重，HBO治疗后上述的病理损伤明显减轻；与NC组相比，HADA组1、3d脑组织中GLUT1阳性细胞的比率显著升高（P<0.05），HBO组GLUT1阳性细胞的比率较HADA组显著降低（P<0.05）；3d较1d各组的GLUT1阳性细胞表达均显著增加（P<0.05）。结论 模型组小鼠较NC组小鼠焦虑样行为增加，提示模型制备成功；HADA后短期内脑组织内的葡萄糖利用仍然是以无氧糖酵解为主，HBO治疗可以较快地恢复脑组织的能量代谢稳态；同时，脱习服小鼠HBO治疗3 d效果较1 d明显，提示HBO治疗可促进脑细胞的功能恢复，有改善脑损伤和恢复能量代谢稳态的作用。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物与分组
1.1.2 主要试剂与仪器
1.2 方法
1.2.1 小动物HADA模型制备
1.2.2 旷场实验
1.2.3 八臂迷宫实验
1.2.4 HBO治疗方法
1.2.5 实验取材
1.2.6 HE染色
1.2.7 Nissl染色
1.2.8 免疫荧光染色
1.2.9 统计学分析
2 结果
2.1 旷场实验结果
2.2 各组小鼠八臂迷宫测试结果
2.3 脑组织HE、Nissl染色结果
2.4 GLUT1免疫荧光染色结果
3 讨论
