摘要:单增李斯特菌是一种常见的革兰氏阳性食源性致病菌,可引起严重的食品公共卫生问题。植物乳杆菌抗菌肽PNMGL2对此食源性致病菌具有明显的抑制作用,但抗菌机制不清楚。杀菌曲线显示PNMGL2能有效抑制单增李斯特菌的生长。碘化丙啶(propidium iodide,PI)摄取和乳酸脱氢酶释放实验表明,PNMGL2可以破坏细菌的膜完整性。进一步通过扫描电子显微镜、透射电子显微镜和激光共聚焦显微镜观测到PNMGL2对其细胞的可视化损伤,促进孔隙形成,破坏细胞膜完整性,增加膜通透性,触发细胞内物质(磷、钾、ATP、蛋白质和核酸)泄漏。此外PNMGL2还可抑制单增李斯特菌生物被膜的形成和外毒素的溶血活性。该研究初步探讨了PNMGL2对单增李斯特菌的抑菌机理,为PNMGL2作为新型食品抗菌剂的开发利用提供了理论依据。
文章目录
1材料与方法
1.1材料与试剂
1.2 仪器与设备
1.3 实验方法
1.3.1 抗菌肽PNMGL2对单增李斯特菌的抑菌活性
1.3.1.1 生长曲线
1.3.1.2 杀菌曲线
1.3.2 抗菌肽PNMGL2对单增李斯特菌细胞膜完整性的影响
1.3.2.1 碘化丙啶(propidium iodide,PI)的摄取
1.3.2.2 LDH活性
1.3.3 抗菌肽PNMGL2对单增李斯特菌细胞形态及内部结构的影响
1.3.3.1 激光共聚焦显微镜(confocal laser-scanning microscopy,CLSM)
1.3.3.2扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)
1.3.3.3 透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)
1.3.4 抗菌肽PNMGL2对单增李斯特菌细胞膜通透性的影响
1.3.5 抗菌肽PNMGL2对单增李斯特菌生物被膜形成的影响
1.3.6 抗菌肽PNMGL2的溶血性
1.3.7 数据处理与统计分析
2 结果与分析
2.1 抗菌肽PNMGL2的抑菌活性
2.2 抗菌肽PNMGL2对细胞膜完整性的影响
2.3 抗菌肽PNMGL2对细胞形态和细胞内组织的影响
2.4 抗菌肽PNMGL2对细胞膜通透性的影响
2.5 抗菌肽PNMGL2抑制生物被膜的形成
2.6 抗菌肽PNMGL2的溶血性
3 讨论
4 结论