摘要：[目的]探究JAZ(Jasmonate ZIM-domain)基因在绿豆对群结腐霉（Pythium myriotylum）抗性中的功能，为绿豆根腐病的防治提供参考。[方法]对绿豆JAZ家族进行鉴定并分析其在群结腐霉侵染后的表达模式，通过转录组数据及实时荧光定量聚合酶链式反应（q-PCR）筛选出两个目的基因，构建两个目的基因的过表达及基因编辑载体，通过烟草瞬时转化及转基因绿豆毛状根表达研究其对群结腐霉抗性的功能，并对’苏绿1号’幼苗喷施茉莉酸甲酯（MeJA），分析表达模式的变化。[结果]群结腐霉可以侵染绿豆叶片及根茎交接处，从绿豆JAZ家族基因中筛选出VrJAZ1和VrJAZ12两个表达模式随群结腐霉侵染时间延长而下调的目的基因，喷施MeJA后，VrJAZ1和VrJAZ12 的表达模式发生了变化，过表达目的基因降低了对群结腐霉的抗性，基因编辑目的基因提高了对群结腐霉的抗性。[结论]VrJAZ1和VrJAZ12是通过调节JA信号的转导从而负调控绿豆对群结腐霉的抗性。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 绿豆叶片接种方法
1.3 载体构建方法
1.4 烟草瞬时表达及接种方式
1.5 绿豆毛状根转化及接种方式
1.6 数据分析方法
2 结果与分析
2.1 群结腐霉侵染绿豆叶片表型
2.2 JAZ家族基因的系统进化分析
2.3 JAZ响应群结腐霉侵染表达模式分析
2.4 VrJAZ候选基因q-PCR验证
2.5 茉莉酸信号介导绿豆对群结腐霉的抗性分析
2.6 烟草瞬时表达接种群结腐霉及抗性评价
2.7 转基因绿豆毛状根对群结腐霉的抗性分析
2.8 转基因后绿豆根毛接种群结腐霉抗性评价
3 结论与讨论
