摘要：目的 探讨叉头盒M1(FOXM1)转录因子通过靶向透明质酸介导的运动受体（HMMR）对骨肉瘤（OS）细胞凋亡和自噬的影响。方法 使用慢病毒载体构建敲低FOXM1和过表达HMMR的OS细胞系，将转染空载慢病毒的细胞作为对照组，转染sh-FOXM1慢病毒的细胞作为敲低FOXM1组，转染sh-FOXM1慢病毒和OE-HMMR慢病毒的细胞作为过表达HMMR组。采用Western blot方法检测正常成骨细胞（hFOB1.19）和OS细胞（U-2OS）中FOXM1蛋白的表达；通过流式细胞术检测对照组、敲低FOXM1组和过表达HMMR组U-2OS细胞的凋亡率；采用Western blot方法检测对照组和敲低FOXM1组OS细胞中HMMR蛋白、自噬蛋白（LC3Ⅰ/Ⅱ）、凋亡相关蛋白（Cleaved-Caspase3、Bax）的表达以及过表达HMMR组OS细胞中自噬蛋白（LC3Ⅰ/Ⅱ）的表达。结果 FOXM1在U-2OS细胞中的表达明显高于hFOB1.19细胞（t=38.780,P<0.005）。与对照组相比，敲低FOXM1组U-2OS细胞凋亡率显著增加（t=3.517,P<0.05）,Cleaved-Caspase3、Bax、LC3Ⅰ/Ⅱ和HMMR蛋白表达显著下降（t=3.155～6.334,P<0.05），而过表达HMMR恢复了敲低FOXM1导致的凋亡率增加和自噬抑制（F=31.00、160.20,P<0.05）。结论 FOXM1敲低通过降低HMMR蛋白的表达促进OS细胞凋亡和抑制OS细胞自噬。
文章目录
1 材料与方法
1.1 细胞培养
1.2 细胞转染
1.3 Western blot检测蛋白表达
1.4 流式细胞术检测细胞凋亡
1.5 统计学分析
2 结果
2.1 FOXM1在OS细胞中的表达
2.2 FOXM1对OS细胞凋亡的影响
2.3 FOXM1对OS细胞自噬的影响
2.4 FOXM1对HMMR蛋白表达的影响
2.5 过表达HMMR对敲低FOXM1导致的凋亡和自噬的影响
3 讨论
