TRIM45靶向IGF-1R抑制乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的机制

2024-05-22 青岛大学学报(医学版)300 0.48M 0

  摘要:目的 探究三结构域蛋白45(TRIM45)通过靶向胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制人乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的作用机制。方法 将人乳癌MCF-7细胞分为TRIM45过表达组、空载对照组及阴性对照组。通过细胞增殖实验及划痕实验进行细胞增殖及迁移能力检测,采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)、自噬相关蛋白8(ATG8)的表达,通过免疫沉淀实验分析TRIM45与IGF-1R的结合,采用WB法检测促增殖蛋白IGF-1R和簇集蛋白(CLU)的表达。结果 与空载对照组相比较,TRIM45过表达组不同时间的细胞增殖率及迁移率均显著降低(F=19.87~177.91,P<0.05)。与空载对照组相比较,TRIM45过表达组细胞自噬相关蛋白p62的表达显著降低,LC3B和ATG8的表达显著增加(F=22.97~113.50,P<0.05)。TRIM45可以与IGF-1R结合,并且TRIM45过表达组细胞IGF-1R及CLU蛋白表达较空载对照组显著降低(F=51.06、30.45,P<0.05)。结论 TRIM45可以与IGF-1R结合,抑制IGF-1R及CLU的表达,诱导乳癌细胞自噬,抑制乳癌细胞的增殖和迁移能力。

  文章目录

  1 材料与方法

  1.1 实验材料

  1.2 实验方法

  1.2.1 细胞培养

  1.2.2 细胞转染

  1.2.3 蛋白质免疫印迹(WB)法检测蛋白表达

  1.2.4 细胞增殖实验

  1.2.5 划痕实验

  1.2.6 免疫沉淀(IP)实验

  1.3 统计学分析

  2 结果

  2.1 TRIM45对MCF-7细胞增殖活力的影响

  2.2 TRIM45过表达对MCF-7人乳癌细胞迁移能力的影响

  2.3 TRIM45对MCF-7细胞自噬的影响

  2.4 TRIM45与IGF-1R的相互作用

  2.5 TRIM45对乳癌细胞IGF-1R和CLU蛋白表达的影响

  3 讨论



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