摘要：酶解法火麻肽制备具有安全性好、能耗低、营养损失小等优点。研究在综合脱脂火麻仁籽粕蛋白提取以及蛋白水解酶筛选的基础上，以穿梭质粒pYD1为表达载体，将源于牛肠道宏基因组文库中的蛋白水解酶NX1101锚定在酿酒酵母菌株（EYB100）表面，并以此重组菌株作为全细胞催化剂制备火麻多肽。酶学性质分析发现，该全细胞催化剂的最适反应pH值为8.0，在pH 8～10的酶活稳定性较高，为耐碱性全细胞催化剂；其最适反应温度50 ℃，在50 ℃以下时酶活稳定性较高。脱脂火麻蛋白经表面展示表达NX1101的重组酵母全细胞催化剂酶解后，共获得1095个多肽，其中氨基酸数量≤10的短肽数量达140个。全细胞催化剂酶解效率相较常规酶解技术（以碱性蛋白酶粉剂为对照）增加6.5倍以上。
文章目录
1 材料与方法
1.1 表面展示NX1101蛋白酶全细胞催化剂重组菌株构建
1.2 NX1101蛋白酶全细胞催化剂重组菌株酶活测定
1.3 脱脂火麻仁籽粕制备及蛋白含量测定
1.4 脱脂火麻仁籽粕蛋白提取
1.5 火麻多肽制备与LC/MS鉴定
2 结果与分析
2.1 NX1101蛋白酶全细胞催化剂构建与酶活力检测
2.2 火麻脱脂籽粕蛋白提取
2.3 脱脂火麻籽粕多肽制备与LC/MS鉴定
3 讨论
4 结论
