还原型谷胱甘肽诱导溶菌酶界面组装成膜机制及膜性能分析

2024-05-25 食品科学280 1.36M 0

  摘要:构建一种绿色安全、无色透明、粘附性强、适用性广的功能化涂层是食品活性包装领域亟待解决又极具挑战的瓶颈问题。本课题研究发现还原型谷胱甘肽可以打断溶菌酶的部分二硫键使其发生解折叠并在气/水界面组装形成肉眼可见的薄膜。NPM染色实验证明还原性谷胱甘肽打断了溶菌酶的二硫键后释放出了游离巯基。色氨酸荧光光谱和溶菌酶活性检测实验共同验证了溶菌酶的二硫键Cys6-Cys127发生了断裂。另外,通过溶菌酶活性检测发现解折叠的溶菌酶依然具有抗菌活性。该溶菌酶膜无色透明,原子力显微镜和透射电镜的结果显示其由溶菌酶聚集体组成,表面均匀且光滑致密。X-射线光电子能谱和激光共聚焦拉曼光谱的结果均表明该溶菌酶纳米膜可能具有界面粘附性。椭偏仪测试结果显示该膜的最大厚度在900 nm左右,且不随孵育时间的延长或反应物浓度的增加而无限制增加;其刚性值大约在29.32-34.21 μN/nm,弹性模量为24.00-27.93 GPa,硬度值为0.44-0.49 GPa,符合蛋白膜的强度范围;膜的接触角在70°左右,较为亲水;其热稳定性较高,200 ℃条件下不发生降解。该溶菌酶纳米膜的制备为构筑新型可食性涂层提供新的思路与借鉴。

  文章目录

  1. 材料方法

  1.1 材料与试剂

  1.2 仪器与设备

  1.3 试验方法

  1.3.1 Lys纳米膜的制备

  1.3.2 部分解折叠溶菌酶游离巯基的变化

  1.3.3 色氨酸荧光的动态监测

  1.3.4 Lys活性检测

  1.3.5 Lys纳米膜的透明度

  1.3.6 透射电子显微镜(TEM)观察

  1.3.7 原子力显微镜(AFM)观察

  1.3.8 X-射线能谱测试

  1.3.9 激光共聚焦拉曼光谱分析

  1.3.10 Lys纳米膜的厚度测定

  1.3.11 Lys纳米膜的表面疏水性测定

  1.3.12 Lys纳米膜的力学性质测定

  1.3.13 Lys纳米膜的热稳定性测定

  1.3.14 数据分析

  2.结果与分析

  2.1 GSH诱导Lys发生巯基-二硫键交换反应机理探讨

  2.2 Lys纳米膜的形貌分析

  2.3 Lys纳米膜的界面粘附性分析

  2.4 Lys纳米膜的性能表征

  2.4.1 Lys纳米膜的厚度分析

  2.4.2 Lys纳米膜的表面疏水性分析

  2.4.3 Lys纳米膜的力学性能分析

  2.4.4 Lys纳米膜的热稳定性分析

  3. 结论



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