摘要：通过UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对桑椹化学成分及血清药物化学进行研究，探讨桑椹的药效物质基础，结合网络药理学及分子对接方法，确定桑椹抗氧化作用的质量标志物（Q-Marker），并建立其HPLC含量测定方法。利用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS对桑椹化学成分及血清化学成分进行分析，以共有成分作为Q-Marker候选成分，引入网络药理学方法获得桑椹抗氧化的关键靶点，解析其主要通路以及生物学过程，进而探讨桑椹成分-靶点-通路的网络关系，预测桑椹发挥抗氧化的作用机制及Q-Marker。基于分子对接对关键靶点和化合物进行验证。建立桑椹潜在质量标志物的HPLC含量测定方法，对不同流通地桑椹药材进行质量评价。从桑椹的乙醇提取物和血清中分别获得74和43个化合物。经与网络药理学相关联后分别获得15和11个桑椹发挥抗氧化作用的关键靶点和关键化合物。分子对接结果显示新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和芦丁具有较好的活性，是桑椹发挥抗氧化作用的关键化合物，SRC、AKT1、CASP3、EGFR是桑椹发挥抗氧化作用的关键靶点。利用HPLC法在不同批次桑椹中均检出新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和芦丁，但各成分含量差异较大，总含量在0.484 6～2.557 8 mg/g之间。结果表明新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸和芦丁可作为桑椹抗氧化作用的潜在Q-Marker，为评价不同来源桑椹的抗氧化能力提供参考依据。
文章目录
1材料与方法
1.1 实验药材
1.2 实验仪器
1.3 试剂
1.4 实验动物
1.5 桑椹成分分析
1.5.1 供试品溶液的制备
1.5.2 色谱和质谱条件
1.6 桑椹血清药物化学分析
1.6.1 桑椹乙醇提取物的制备
1.6.2 动物分组与给药
1.6.3 血清预处理
1.7 DPPH法验证桑椹活性成分的抗氧化作用
1.8 桑椹抗氧化活性成分的含量测定
1.8.1 HPLC色谱条件
1.8.2 供试品溶液的制备
1.8.3 标准曲线的绘制
1.8.4 样品含量测定
2 结果与分析
2.1 桑椹药材成分的鉴定
2.2 含药血清中化学成分的鉴定
2.3 基于网络药理学的桑椹功效关联性物质预测
2.3.1桑椹活性靶点预测
2.3.2 GO富集分析和通路注释
2.3.3 化合物-靶点-通路网络图的构建
2.4 活性成分-靶点分子对接研究
2.5 桑椹活性成分的抗氧化作用验证及含量检测
2.5.1 抗氧化作用
2.5.2 检测方法的精密度试验
2.5.3 稳定性试验
2.5.4 重复性试验
2.5.5 加样回收率试验
2.5.6 样品测定结果
3 讨论
