摘要：该研究以酶活性为评价指标，通过苯胺蓝脱色法，从自然界特殊环境中筛选出一株对木质素具有高效降解能力的产漆酶细菌，生理生化指标和16S rDNA分子生物学鉴定结果表明该菌株为枯草芽孢杆菌，命名为BacillussubtilisHB-011。通过GO、COG、KEGG和CAZY数据库注解Bacillus subtilis HB-011全基因分析初步推测了其降解木质素相关途径。酶学性质研究实验表明，发酵漆酶在pH值为2～6、温度为20～55 ℃条件下具有较好的稳定性。菌株Bacillus subtilis HB-011在降解木质素方面具有很好的应用潜力。该研究为高效降解木质素漆酶的研究提供了菌种储备和理论依据。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 样品来源
1.1.2试剂及培养基
1.1.3仪器设备
1.2筛选方法
1.3漆酶酶活力测定方法
1.4木质素降解率的测定
1.4.1木质素标准曲线测定
1.4.2木质素浓度及降解率计算
1.5菌株鉴定
1.6全基因分析
1.6.1 基因组组装
1.6.2基因预测
1.6.3基因组圈图的绘制
1.6.4基因功能分析
1.7酶学研究
1.7.1粗酶液的纯化
1.7.2动力学参数测定
1.7.3稳定性测试
1.7.4漆酶二级结构测定
1.8统计分析
2 结果与分析
2.1 复筛菌株酶活初步测定
2.2菌株鉴定结果
2.2.1 油镜镜检
2.2.2琼脂糖凝胶电泳及发育树的构建
2.3Bacillus subtilis HB-011降解碱木质素分析
2.4 Bacillus subtilis HB-011基因组分析
2.5基因数据库注释
2.5.1 GO数据库注释
2.5.2 COG数据库注释
2.5.3 KEGG数据库注释
2.5.4 CAZY数据库注释
2.5.5 Bacillus subtilis HB-011降解木质素机制解析
2.6酶学性质
2.6.1 酶促动力学
2.6.2 酶的二级结构
3 结论与讨论
