摘要:为改进攸县麻鸭N,N-二甲基乙酰胺(N,N-Dimethylacetamide,DMA)细管精液简易冷冻技术,本实验采用不同日龄(140~160日龄、360日龄)公鸭,以精子活力、受精率与孵化率为检测指标,优化采精方法(不捆绑母鸭双脚)、稀释液[FEB、B(Beltsville Poultry Semen Extender)、L(Lake)、LR(Lake and Ravie)]、冷冻速率[熏蒸高度段(0.5~3 cm),熏蒸时间段(1~7 min)]、DMA浓度(3%、6%、9%),以及模拟远距离运输精液制作冻精。结果显示:① 在优化采精方法上,不捆绑母鸭双脚时采精时间(1.52 min)短于捆绑母鸭双脚(2.98 min)(P<0.05),单次采精量与精子活力无显著差异;140~160日龄组精液量(0.46 mL)与精子密度(7.29×109个/mL)均高于360日龄组(P<0.05),但精子活力差异不显著。②在稀释液筛选方面,B稀释液组的精子体外存活时间优于其他3种(P<0.05),LR稀释液组的冻精活力优于其他3种(P<0.05)。③在冷冻速率优化方面,熏蒸高度0.5 cm组优于1.5 cm组(P<0.05),与1.0 cm组无显著差异;0.5 cm组熏蒸时间在1~7 min的冻精活力无显著差异,且2 min组最高。④在DMA浓度优化方面,各组冻精活力差异显著,6%浓度组最佳(P<0.05),为0.4。⑤精液稀释冷藏后模拟远距离运输制作冻精,采用优化参数制作的冻精组与原精组的受精率(81.36%、91.36%)、孵化率(83.83%、85.45%)无显著差异,冷藏时间0 h组与2、4 h组也无显著差异,但均优于8 h组(受精率45.52%、孵化率74.42%);每4 d输精1轮,4轮受精率总体呈现依次升高的趋势。因此,攸县麻鸭采用不捆绑母鸭双脚的诱情采精方式、LR稀释液、终浓度6% DMA冷冻保护剂,距离液氮面0.5 cm熏蒸2 min,40℃水浴解冻,且4 h内冷藏运输制作冻精可行。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 实验器材与试剂
1.3 实验设计
1.3.1 采精方法改进与公鸭日龄比较
1.3.2 稀释液筛选
1.3.3 冷冻速率筛选
1.3.4 冷冻保护剂浓度筛选
1.3.5 优化方案制作冻精输精效果
1.3.6 模拟远距离运输精液制作冻精输精效果
1.4 实验方法
1.4.1 稀释液配制
1.4.2 精液采集
1.4.3 精子活力与密度检测
1.4.4 冷冻精液制作
1.4.5 人工输精
1.5 统计分析
2 结果与分析
2.1 不同采精方法
2.2 不同日龄公鸭采精训练效果比较
2.3 冷冻技术参数筛选
2.3.1 不同稀释液保存精子的活力随时间变化的结果
2.3.2 不同稀释液冻精活力比较
2.3.3 不同熏蒸高度冻精活力比较
2.3.4 不同熏蒸时间的冻精活力比较
2.2.5 不同DMA浓度冻精活力比较
2.4 模拟精液采集稀释后不同冷藏运输时间制作冻精效果
2.5 冻精输精效果检测
2.5.1 优化参数后制作冻精输精孵化情况
2.5.2 模拟远距离运输冻精输精效果比较
3 讨 论
3.1 采精方法改进与不同日龄公鸭的采精效果
3.2 以DMA为冷冻保护剂的冷冻精液制作参数的筛选
3.3 冻精输精效果
3.4 远距离运输后制作冻精的可行性
4结 论