摘要：目的：基于mTOR/NLRP3信号通路探讨电针预处理抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法：70只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、电针＋生理盐水组，电针＋MHY1485(mTOR激动剂）组，各14只。采用超声心动图评估大鼠心脏功能指标心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率分数（LVFS），苏木精-伊红（HE）染色法观察心肌组织病理学改变，酶联免疫吸附法（ELISA）检测心肌组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平变化，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测心肌组织中凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)、白细胞介素-1β( IL-1β)、白细胞介素-18（IL-18）的基因表达水平，蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、NOD样受体家族蛋白３（NLRP3）及核因子-κB（NF-κB）的表达水平。结果：与假手术组相比，模型组大鼠FS、EF值下降（P＜0.05）；心肌组织出现肌纤维断裂、结构模糊、炎性细胞浸润等现象，心肌组织内TNF-α含量升高（P＜0.05），caspase-I、ASC、IL-1β、IL-18的基因相对表达水平（P＜0.05）与mTOR、NLRP3、NF-κB的蛋白表达水平均上调（P＜0.05）；与模型组相比，电针组大鼠FS、EF值上升（P＜0.05），心肌组织肌纤维结构改善，炎性细胞浸润减少，心肌组织内的TNF-α含量降低（P＜0.05），caspase-I、ASC、IL-1β、IL-18的基因相对表达水平（P＜0.05）与mTOR、NLRP3、NF-κB的蛋白表达水平（P＜0.05）均下调；与电针＋生理盐水组比，激动剂组大鼠心肌组织损伤加重，心肌组织内TNF-α含量升高（P＜0.05），caspase-I、ASC、IL-1β、IL-18的基因相对表达水平（P＜0.05）与mTOR与NLRP3、NF-κB的蛋白表达水平（P＜0.05）均上调。结论：mTOR激动剂MHY1485可减弱电针对MIRI大鼠心肌组织损伤的保护作用，电针预处理能减轻MIRI大鼠心肌细胞炎性反应，进而改善缺血再灌注引起的心肌组织损伤；因此推断电针预处理改善大鼠MIRI损伤的机制可能与mTOR/NLRP3信号通路有关。
文章目录
1.材料与方法
1.1 实验动物与分组
1.2 主要仪器及试剂
1.3干预方法
1.4模型制备
1.5观察指标与检测方法
1.5.1超声心动图观察大鼠心功能变化情况
1.5.2苏木素-伊红（HE）染色
1.5.3 ELISA检测心肌组织中TNF-a含量水平
1.5.4 Western blot法检测大鼠缺血心肌组织中mTOR、NF-κB、NLRP3蛋白表达
1.5.5实时荧光定量PCR检测
1.6统计学处理
2、实验结果
2.1电针预处理对MIRI大鼠心功能的影响
2.2电针预处理对MIRI大鼠心肌组织病理学形态的影响
2.3.电针预处理对MIRI大鼠心肌组织中TNF-α表达水平的影响
2.4电针预处理对MIRI大鼠心肌细胞中mTOR、NLRP3以及NF-κB蛋白表达的影响
2.5电针预处理对MIRI大鼠心肌细胞中caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18mRNA水平的影响
3、讨论
