摘要：目的：观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤（myocardialischemia-reperfusioninjury，MIRI）大鼠心功能、心肌损伤相关指标及自噬水平的影响，探讨电针预处理改善心肌缺血再灌注损伤的可能机制，进一步发挥中医“治未病”思想指导临床实践的优势。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、电针组、电针+生理盐水组、电针+激动剂组，每组12只。大鼠结扎左冠状动脉前降支30min再灌注4h建立I/R模型。电针组、电针+生理盐水组、电针+激动剂组于“内关”行电针干预，每次20min，每天一次，连续4天；电针+激动剂组在每次电针前30min于腹腔注射NLRP3受体激动剂尼日利亚菌素钠盐Nigericin（1mg/kg）；电针+生理盐水组在每次电针前30min于腹腔注射生理盐水，剂量同激动剂组。采用超声心动图观察造模后4h后大鼠左心室射血分数（leftventricularejectionfraction，LVEF）、左心室短轴缩短率（Leftventricularfractionalshortening，LVFS））评估心功能；ELISA法检测血清中炎性因子白细胞介素-6(IL-6）水平；苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠心肌组织形态；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Westernblot法检测NLRP3、Beclin1、TRIF、Caspase-1、LC3、IL-18mRNA和蛋白表达。结果：与假手术组相比，模型组大鼠LVEF、LVFS值明显降低（P<0.05），心肌纤维排列紊乱、结构模糊、有大片炎性浸润，心肌组织中IL-6水平及NLRP3、TRIF、Beclin1、LC3mRNA和蛋白等指标含量均升高（P<0.05）；与模型组相比，电针组大鼠LVEF、LVFS明显升高（P<0.05），心肌纤维断裂减轻，少量炎性细胞浸润，心肌组织中IL-6水平、NLRP3mRNA及蛋白表达均降低（P<0.05），TRIF、Beclin1、LC3mRNA和蛋白含量均升高（P<0.05）；与电针组相比，电针+生理盐水组LVEF、LVFS及心肌组织中IL-6水平及NLRP3、TRIF、Beclin 1、LC3 mRNA和蛋白含量均无明显变化（P>0.05），而电针+激动剂组大鼠LVEF、LVFS明显降低（P<0.05），心肌结构异常，有明显的组织纤维化和炎性浸润，心肌组织中IL-6水平、NLRP3 mRNA及蛋白表达均升高（P<0.05），TRIF、Beclin 1、LC3 mRNA和蛋白含量均降低（P<0.05）。结论：电针预处理可通过调控自噬水平减轻I/R大鼠心肌损伤，其机制可能与NLRP3/TRIF/Beclin 1信号通路有关，对中医疗法防治心肌缺血再灌注损伤有一定指导意义。
文章目录
1 材料与方法
1.1实验动物与分组
1.2主要仪器与试剂
1.3模型制备
1.4干预方法
1.5观察指标及检测方法
1.6统计学处理
2结果
2.1 各组大鼠超声心动图LVEF、LVFS比较
2.2 各组大鼠心肌组织病理切片形态学比较
2.3 各组大鼠心肌组织IL-6水平比较
2.4 各组大鼠心肌组织NLRP3、Beclin 1、Caspase-1、LC3、IL-18 mRNA表达比较
2.5 各组大鼠心肌组织NLRP3、TRIF、Beclin 1、LC3蛋白表达比较
3讨论
