摘要:以提取温度(20 ℃、40 ℃、60 ℃、80 ℃、100 ℃)条件为变量,采用水提醇沉法提取得到黑果枸杞多糖(Lycium ruthenicum Murr polysaccharides, LRPs);通过分析多糖得率、碳水化合物含量、糖醛酸含量、紫外光谱、特征性红外光谱、相对分子质量和单糖组成,研究提取温度对LRPs理化特性的影响;通过对DPPH、ABTS+、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除活性及铁氰化钾的还原能力的检测,分析提取温度对LRPs抗氧化活性的影响;通过分析LRPs对RAW264.7细胞活力及细胞因子分泌的影响,研究提取温度对LRPs免疫调节活性影响。结果表明:不同提取温度不仅可以影响LRPs 的理化特性,还可以对其抗氧化和免疫调节活性产生影响。在60 ℃(LRP60,2.38% ± 0.11%)和80 ℃(LRP80,2.30% ± 0.25%)提取多糖得率显著高于其他多糖;LRP20、LRP40、LRP60、LRP80和LRP100的相对分子质量分别为293.34 kDa、227.94 kDa、233.45 kDa、273.53 kDa和233.66 kDa。LRPs单糖组成主要为L-Ara、D-Gal、D-Glc、D-Man、L-Rha和D-GlcA,并含有少量D-Xyl,其中LRP80和LRP100含有D-GalA;在60 ℃和80 ℃温度下提取得到的黑果枸杞多糖LRP60和LRP80具有良好的抗氧化活性和免疫调节活性,提取温度60 ℃时,黑果枸杞多糖单糖组成中D-Gal和L-Ara比例升高,抗氧化活性较好;提取温度80 ℃时,D-GlcA、D-Glc和D-GalA比例升高,黑果枸杞多糖免疫调节活性较好。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 不同温度对黑果枸杞多糖的提取
1.2.2 不同温度提取黑果枸杞多糖的理化性质测定
1.2.2.1 碳水化合物含量的测定
1.2.2.2 糖醛酸含量的测定
1.2.2.3 紫外扫描分析
1.2.2.4 相对分子质量测定
1.2.2.5 红外光谱检测
1.2.2.6 单糖组成分析
1.2.3 LRPs抗氧化活性研究
1.2.3.1 DPPH自由基清除能力
1.2.3.2 ABTS+自由基清除能力
1.2.3.3 羟基自由基清除能力
1.2.3.4 超氧阴离子自由基清除活性
1.2.3.5 还原力
1.2.3.6 LRPs抗氧化活性相关性分析
1.2.4 LRPs免疫活性研究
1.2.4.1 LRPs对RAW264.7细胞活性的影响
1.2.4.2 LRPs对RAW264.7细胞炎性因子IL-1β和TNF-α分泌的影响
1.3 数据处理
2 结果与分析
2.1 LRPs理化特性分析
2.1.1 LRPs理化性质分析
2.1.2 红外光谱检测分析
2.1.3 相对分子质量
2.1.4 单糖组成分析
2.2 LRPs抗氧化活性分析
2.2.1 LRPs对DPPH自由基的清除活性
2.2.2 LRPs对ABTS+自由基的清除活性
2.2.3 LRPs对羟基自由基的清除活性
2.2.4 LRPs对超氧阴离子的清除活性
2.2.5 LRPs的亚铁还原力
2.2.6 LRPs抗氧化活性相关性分析
2.3 LRPs免疫调节活性分析
2.3.1 LRPs对RAW264.7细胞活力的影响
2.3.2 LRPs对RAW264.7细胞因子IL-1β和TNF-α分泌的影响
3 讨论与结论