摘要:目的通过检测微血管内皮细胞活性、线粒体功能、内质网功能、炎性因子、黏附分子等指标,探讨高糖高脂诱导的微血管内皮细胞损伤及参松养心胶囊的干预作用。方法 2022年6月—2023年2月于络病理论创新转化全国重点实验室开展实验。将人微血管内皮细胞随机分为5组,正常组、模型组和参松养心低、中、高剂量组。ELISA检测细胞活性,荧光显微镜检测细胞线粒体膜电位,Western-blot检测DRP1、MFN2、GRP78、NF-κBp65、P-selectin、E-selectin、IL-6的蛋白水平。结果与正常组比较,模型组的细胞生存活性和线粒体膜电位显著降低,DRP1、GRP78、NF-κBp65、P-selectin、E-selectin、IL-6蛋白表达明显增高,MFN2蛋白表达明显降低。与模型组比较,参松养心各剂量组的细胞生存活性和线粒体膜电位均显著升高(F/P=54.108/<0.01),GRP78、NF-κBp65、E-selectin的蛋白表达显著降低(F/P=4.880/<0.01、5.033/<0.01、4.374/<0.05);参松养心低、高组的MFN2蛋白表达显著升高(F/P=4.803/<0.05),IL-6蛋白表达显著降低(F/P=3.206/<0.05);参松养心中、高组的DRP1、P-selectin蛋白表达显著降低(F/P=6.717/<0.05、3.275/<0.01)。结论参松养心胶囊可以提高微血管内皮细胞的生存活性,维持线粒体稳态,减轻内质网应激,抑制炎性反应,降低黏附分子水平,从而发挥保护高糖高脂诱导损伤的微血管内皮细胞的作用。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.3 观察指标与方法
1.3.1 ELISA法检测细胞生存活性(CCK8):
1.3.2 荧光显微镜检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP):
1.3.3 蛋白免疫印迹(Western-blot)方法检测蛋白表达:
1.4 统计学方法
2 结 果
2.1 各组微血管内皮细胞生存活性比较
2.2 各组微血管内皮细胞MMP变化情况
2.3 各组微血管内皮细胞DRP1、MFN2、GRP78蛋白表达比较
2.4 各组微血管内皮细胞NF-κB p65、P-selectin、E-selectin、IL-6蛋白表达
3 讨论